細胞名稱 腎上腺皮質癌細胞;SW-13
形態特性: 上皮樣;多角
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞是1971年8月從55歲的患有腎上腺皮質癌的白人女性患者中分離建立的。該患者的病理診斷為Ⅳ級腎上腺皮質原發性小細胞癌。電鏡顯示,該細胞有許多球形縫隙連接(BGJ)。
培養條件: L15:LeibovitzMedium10%FBS
傳代方法: 1:3~1:8傳代;每周2~3次。
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養法(-)
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
腎上腺皮質癌細胞;SW-13 | 貼壁生長 | EY-X63249 |
?
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
瑞格非尼FXR2 Antibody對
MK-2866FEZ1 (D9R8Q) Rabbit mAb氧基酚
XTT鈉鹽PI3 Kinase p110α (C73F8) Rabbit mAb6-溴-2-并噻唑啉酮
二氫獼猴桃內酯,奇異果內酯(標準品)PI3 Kinase p110α (C73F8) Rabbit mAb三基基溴化
二氫獼猴桃內酯,奇異果內酯SMYD2 Antibody鹽酸多巴
馬西替坦;ACT064992PI3 Kinase p110γ Antibody1,二(溴甲基)
組蛋白去酰化酶抑制劑(M 344)DR4 (D9S1R) Rabbit mAb對二
2--5-甲酰;GW 9662Cleaved Caspase-7 (Asp198) (D6H1) Rabbit mAb (PE Conjuga)二甲氧基膦酰基酸叔丁酯
2-硝基咪唑 PI3 Kinase p110α Antibody對二甲
(三氟甲基)-1H-咪唑 MLH1 (D38G9) Rabbit mAb
2-甲基-三氟甲基咪唑 MLH1 (D38G9) Rabbit mAb1,2-二烷
2-氨基咪唑硫酸鹽 PI3 Kinase p85 (19H8) Rabbit mAbN-基
奧當卡替(MK-0822)PI3 Kinase p85 (19H8) Rabbit mAbN-基二
硝基兒茶酚EOMES (D8D1R) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2,二-7-甲氧基喹唑啉
硝基兒茶酚MHC Class II (I-A/I-E) (M5/114.15.2) Rat mAb (FITC Conjuga)甲基基硫
曲格列酮Acetyl-Histone H3 (Lys36) (D9T5Q) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)二甲基二硫
Tri-Methyl-Histone H3 (Lys79) Antibody
(標準品)Phospho-SRF (Ser103) Antibodyβ-羥基異戊酸
鹽酸馬尼地平Rab10 Antibody2-酰
鹽酸馬尼地平(標準品)PI3 Kinase Class III (D9A5) Rabbit mAbD-溴氨酸
二氫睪酮,雄諾龍FXR1 (L662) Antibody甲巰脯酸
多拉菌素STOP (175) Mouse mAb2,二甲基吡咯
3,3,5-三-L-甲狀腺原氨酸,塞羅寧SOD1 (71G8) Mouse mAb甲氧基芐硫
Corylifol A(標準品)SOD1 (71G8) Mouse mAb2,5-二甲基呋喃
溴芬酸鈉EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb氟
溴芬酸鈉(標準品)EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb間
鹽酸氟哌噻噸EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb間二甲
茶多酚;綠茶提取物Fer (5D2) Mouse mAb1,3,5-三溴
四氫姜黃素 Ron (1B5) Mouse mAb2,二羥基-6-甲基嘧啶
管花苷A(標準品)Non-phospho (Active) β-Canin (Ser33/37/Thr41) Antibody甲基哌啶
2’-酰基毛蕊花糖苷(標準品)THEM2 AntibodyN-甲基哌啶
2-[2-(2,2,2-三氟氧基)氧基]基溴 WASP (D9C8) Rabbit mAbL-高
吡咯喹啉醌;Cytochrome c Antibody己二酸單酯
吡咯喹啉醌二鈉鹽;維生素鈉鹽Cytochrome c Antibody1-(基)哌
鹽酸右美托咪定CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb (PE Conjuga)甲酸酯
地夫可特ATP2A1/SERCA1 (A988) Antibody溴-1-
腎上腺皮質癌細胞;SW-13小鼠抗肌內膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒apo-A1ELISAKit產品規格:48T/96T。
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒apo-A1ELISAKit產品規格:48T/96T。
小鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒apo-A1ELISAKit產品規格:48T/96T。
小鼠羥脯氨(Hyp)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產品規格:48T/96T。
小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TSGF)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產品規格:48T/96T。
小鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產品規格:48T/96T。
小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產品規格:48T/96T。
小鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒apo-B100ELISAKit產品規格:48T/96T。