產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬等孢球蟲通用探針法PCR熒光定量試劑盒 | Isospora suis | EY00P9048 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
N-乙酰-D-利卡靈-B;利卡靈B Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein
N-乙酰-D-(標準品) Protein Kinase C (530-558)
D-甲酯鹽酸鹽櫟櫻酸(標準品) pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)
D-甲酯鹽酸鹽連錢草(標準品) pTH (13-34) (human)
2'-甲氧基腺;2'-O-甲基腺苷連翹(標準品) pTH (3-34) (bovine)
2'-甲氧基腺;2'-O-甲基腺苷連翹苷(標準品) S-I-G-S-L-A-K
D-連翹酯苷A(標準品) SAMs Peptide
D-連翹酯苷B(標準品) Simian Virus 40 Large Tumor Antigen Amino-Terminal Peptide
2'-脫氧鳥苷-3'-單磷酸二鈉連翹酯苷E(標準品) Somatostatin-28
2'-脫氧鳥苷-3'-單磷酸二鈉蓮心堿(標準品) Substance P (1-7)
D-α-氨基己二酸蓮心堿高氯酸鹽 Substance P (1-9)
D-α-氨基己二酸蓮心堿高氯酸鹽(標準品) Substance P (7-11)
D-α-氨基己二酸蓮須(標準品) TA-0910, taltirelin
D-高苯氨酸蓮子(標準品) TRH, Free Acid
D-高苯氨酸蓮子心(標準品) Urocortin III, mouse
豬等孢球蟲通用探針法PCR熒光定量試劑盒成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)赤霉素GA3 質(zhì)量規(guī)格:粘度100000mPa.s125mL×4
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)赤霉素GA3 質(zhì)量規(guī)格:4000mPa.s,BR125mL×4
成纖維細胞生長因子23(FGF23)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品125mL×4
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR100mL
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級125mL×4
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR125mL×4
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(植物細胞培養(yǎng)級) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR125mL×4
淋巴細胞胞漿蛋白1(LCP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(植物細胞培養(yǎng)級) 質(zhì)量規(guī)格:BR,日本進口分裝125mL×4