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產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
嗜人錐蠅探針法PCR熒光定量試劑盒 | Cochliomyia hominivorax | EY00P8837 |
產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
3-[(2-)氨基]緩沖李氏菌增菌肉湯基礎/Buffered Listeria Enrichment Broth N-Methylfurohydroxamic Acid
4-[(N-叔丁氧羰基)氨甲基]苯PALCAM瓊脂/PALCAM Agar 2,2'-Bicinchoninic Acid Dipotassium Salt Hydrate
2-苯基苯甲酸牛津瓊脂基礎/OXA基礎/Oxford Agar Base Chloranilic Acid
2-羥基萘-1-羧酸甲酯LPM瓊脂/李氏LPM瓊脂/LPM Agar Pyrogallol Red
2-氟-6-(二氟甲氧基)吡Half Fraser培養基/Half Fraser Medium Zincon
4-溴吡啶-2(1H)-酮SIM動力培養基/SIM培養基/Motility Test Medium(Semisolid) meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid
鄰乙氧基李氏菌選擇性培養基基礎/改良McBride瓊脂培養基/MMA基礎/Modified Mcbride Agar Base Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt
4-溴甲基肉桂酸甲酯EB增菌肉湯培養基基礎/EB增菌液/EB Enrichment Broth Medium Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt
2,3,4,5-四氟苯甲酰氯Fraser培養基/Fraser Medium 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetrahydrochloride
3-甲氧基-4-(3-甲氧基氧基)苯甲UVM培養基/UVM Medium Bis(2-ethylhexyl) Adipate
N-(2-氯芐基)-N-LM-137瓊脂/LM-137 Agar 3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)
2,6-二氟苯乙改良緩沖蛋白胨水/MBPW Bis(phenylacetyl) Disulfide
1,4-環己二羧酸二甲酯(順反異構體混合物)枸櫞酸鹽培養基/檸檬酸鹽培養基/Citrate Agar Benzopurpurine 4B
沙格列汀一水合物尿素酶瓊脂基礎/尿素瓊脂培養基基礎/Urease Agar Base Pentamethoxy Red
5-溴-3-氯-2-基吡啶硝酸鹽培養基基礎/KCN培養基基礎/Potassium Cyanide Medium Base Benzyl Orange
嗜人錐蠅探針法PCR熒光定量試劑盒基質金屬蛋白酶3(MMP3)(酶聯免疫吸附試驗法)依替膦酸鈉 質量規格:HPLC≥98%,標準品500 ml
基質金屬蛋白酶3(MMP3)(酶聯免疫吸附試驗法)依替膦酸鈉 質量規格:HPLC≥98%,標準品
β-血小板球蛋白(βTG)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:>98%,選擇性組蛋白脫乙酰酶(HDAC6)抑制劑
β-血小板球蛋白(βTG)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:GC≥98%,標準品3×1ml
β-血小板球蛋白(βTG)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:≥98%,BR1ml(500X)
維生素E(VE)(酶聯免疫吸附試驗法)(標準品) 質量規格:AR
組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)(酶聯免疫吸附試驗法)孕烯 質量規格:>98%,進分100ml
成纖維細胞生長因子7(FGF7)(酶聯免疫吸附試驗法)孕烯 質量規格:>95%,BR