產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 肺癌細(xì)胞;Calu-1
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 超微結(jié)構(gòu)特征包括眾多微絨毛,顯著的RER(粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)),溶酶體,脂包含體,無病毒顆粒。含ras(H-ras)癌基因。
培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化10分鐘。1:2。3-4天長滿
傳代情況: P(25+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
?
產(chǎn)品名稱 | 肺癌細(xì)胞;Calu-1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號(hào) | EY-X63934 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
寨卡病檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;CQ8-A2D9形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Zika virus
泛素特異性肽酶13檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;1H11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Ubiquitin specific peptidase 13
含IQ基元GTP酶激活蛋白3檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 過表達(dá)AhR的RAW264.7細(xì)胞;RAW/AhR形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣IQ Motif Containing GTPase Activating Protein 3
Va檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;7D2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣coagulation factor Va
Ⅷa檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;7H4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣coagulation factor Ⅷa
磷化脾臟酪氨激酶檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;Anti-ClasMcAb2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣phospho-Tyrosine-protein kinase SYK
補(bǔ)體3A受體1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 奶牛觸珠蛋白雜交瘤細(xì)胞株;4F11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣C3a anaphylatoxin chemotactic receptor
抗心肌IgM抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;Anti-ClasMcAb1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Anti myocardial IgM antibody
肌聚多糖-β基因檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;1H9D6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣beta-sarcoglycan
肌聚多糖-a 基因檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: CHO細(xì)胞株;AVA-B48-A22形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Alpha-sarcoglycan
HIV核心抗原P24檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO-BAT-KFfut8(-/-)形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣HIV-P24
固醇激素受體Err2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 倉鼠胚腎細(xì)胞;T7pol/p/NBHK(Tet0n形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Steroid hormone receptor ERR2
基孔肯尼亞病抗原檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;CarpIgM形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣chikungunya virus
心營養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: CHO細(xì)胞株;CHOK1-R-ng-D3G6C11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1
蛋白激酶G-II型檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;A4-6A2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣PKG-II
絲氨蛋白酶HTRA1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;MXRA7形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣high-temperature requirement protein A1
H3N2流感檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;A4-1B1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣H3N2
肺癌細(xì)胞;Calu-1表小檗6873-09-2英文名:Epiberberine
英文別名:Berbinium
CAS登錄號(hào):6873-09-2
分子式:C20H18NO4
分子量:336.12
分子結(jié)構(gòu):
外觀:黃色結(jié)晶性粉末
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:黃連、三角葉黃連、云連的干燥根莖。
溶解性:在熱水中溶解,在水或乙醇中微溶,在、中極微溶解,在中不溶。
熔點(diǎn):260℃
藥理藥效:體外對(duì)多種革蘭陽性及陰性菌均具抑菌作用,其中對(duì)溶血性鏈球菌、金葡菌、霍亂弧菌。腦膜炎球菌、志賀痢疾桿菌、傷寒桿菌、白喉?xiàng)U菌等有較強(qiáng)的抑制作用,低濃度時(shí)抑菌,高濃度時(shí)殺菌。對(duì)流感病、阿米巴原蟲、鉤端螺旋體、某些皮膚真菌也有一定抑制作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年