公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
胚胎干細(xì)胞;HES3.3 | 貼壁生長 | EY-X63705 |
細(xì)胞名稱 胚胎干細(xì)胞;HES3.3
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Ajmalicine
CAS No.:483-04-5
中文名:阿嗎
分子式:C21H24N2O3
廣天仙子 訂購|咨詢 煙受體1(NIACR1) 規(guī)格: 1g
N異基去酯 訂購|咨詢 煙酰腺嘌呤二核苷(NAADP) 規(guī)格: 50mg
紫荊皮 訂購|咨詢 型膽受體α1(CHRNα1) 規(guī)格: 0.5g
檀香 訂購|咨詢 型膽受體α1(CHRNα1) 規(guī)格: 1g
土荊皮(金錢松) 訂購|咨詢 型膽受體α2(CHRNα2) 規(guī)格: 1g
訂購|咨詢 型膽受體α3(CHRNα3) 規(guī)格: 100mg
板栗殼 訂購|咨詢 型膽受體α4(CHRNα4) 規(guī)格: 0.5g
賴諾普利 訂購|咨詢 型膽受體α5(CHRNα5) 規(guī)格: 100mg
卡地平 訂購|咨詢 型膽受體α7(CHRNα7) 規(guī)格: 100mg
訂購|咨詢 型膽受體β1(CHRNβ1) 規(guī)格: 100mg
小豆蔻明 訂購|咨詢 型膽受體β2(CHRNβ2) 規(guī)格: 20mg
鄰磺酰 訂購|咨詢 型膽受體β3(CHRNβ3) 規(guī)格: 100mg
醋 訂購|咨詢 海馬鈣蛋白(HPCA) 規(guī)格: 50mg
槐米 訂購|咨詢 海藻糖酶(TREH) 規(guī)格: 2g
侖 訂購|咨詢 海藻糖酶(TREH) 規(guī)格: 100mg
桂枝 訂購|咨詢 家族性地中海熱基因(MEFV) 規(guī)格: 0.5g
酰人生長激素 訂購|咨詢 調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES) 規(guī)格: 2mg
莫司汀 訂購|咨詢 調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES) 規(guī)格: 100mg
Plastin L 淋巴細(xì)胞胞漿蛋白LCP1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Maraviroc
RASD2/Tumor endothelial marker 2 腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml RevalorH Trenbolone acetate
RNF43 環(huán)指蛋白43抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Silibinin
RPLP2 性核糖體蛋白P2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Silibinin
SART3 T淋巴細(xì)胞識別的鱗狀細(xì)胞癌SART3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ezetimibe
SDCCAG10 結(jié)腸癌抗原10抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ezetimibe
SDCCAG8 結(jié)腸癌抗原8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Mepivacaine HCl
SPANX 腫瘤/抗原11.3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Amprenavir
維生素H 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:DBiotin 含量:IND
維生素12 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:VB12 含量:AR,75%
胃液素 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Pepsin(porcinestomachmucose) 含量:生物技術(shù)級,300u/mg
蝸牛酶 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Snailase 含量:BR,300u/mg,懸浮液
蝸牛凝集素 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Snailagglutinin 含量:BR,Ⅰ型,>125CDU/mg
沃來西脫藍(lán)B 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:OracetblueB 含量:BS
烏美司 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Bestatin 含量:USP級,95%,900mcg/mg
鎢硅 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Silicotungsticacidhydrate 含量:AR,86.5%
鎢 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tungsten 含量:AR,99.7%
鎢鉀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Potassiumtungstate 含量:AR,95%
胚胎干細(xì)胞;HES3.3營養(yǎng)瓊脂斜面規(guī)格:250g用途:用于細(xì)菌的純化培養(yǎng)
WS 瓊脂規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌的選擇性分離(GB標(biāo)準(zhǔn))
曙紅瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹
knudson C 培養(yǎng)基規(guī)格:用途:用于蘭花組織培養(yǎng)
松三糖規(guī)格:1g用途:微生物指示劑
平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)規(guī)格:250g用途:標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂,含糖,用于細(xì)菌總數(shù)的測定(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。