細(xì)胞名稱 樹(shù)鼩皮膚成纖維樣細(xì)胞;TSHS4
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一雌性樹(shù)鼩的皮膚組織。2003年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法(-)
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
樹(shù)鼩皮膚成纖維樣細(xì)胞;TSHS4 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63815 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
金屬蛋白酶組織抑制因子檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;16CF7形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Tissue inhibitor of metalloproteinase
整合素α6檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;16CD11-A形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Integrin Alpha 6
整合素β4檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;I41-AG形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Integrin β4
整合素β5檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;19HC5形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Integrin β5
整合素β3檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;16CF7-A5形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Integrin β3
美麗線蟲(chóng)凋亡基因檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-C形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣caenorhabditis elegans death gene
保護(hù)素檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-HCV-E1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣protectin
S100鈣結(jié)合蛋白A6檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。籆HO-HCV-E2形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣S100A6
線粒體核糖體蛋白L41檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-p7形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣MRPL41
CD5分子樣蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-HCV-NS2形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣CD5 Antigen-like
葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白-94檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-HCV-NS4A形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Glucose regulated protein 94kD
S100鈣結(jié)合蛋白PBP檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。籆HO-HCV-NS4B形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣S100P-binding protein
琥珀脫氫酶1-1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Succinate dehydrogenase1-1
C4BPA檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-HCV-NS5A形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣C4BPA
三肽基肽酶I檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5B形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Tripeptidyl-peptidase 1
熱休克蛋白90β1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Heat Shock Protein 90β1
鐮狀瘧原蟲(chóng)IgG抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞plasmodium falciparum antibody
樹(shù)鼩皮膚成纖維樣細(xì)胞;TSHS4賴氨脫羧酶實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基規(guī)格:BR5g詳情介紹
玫瑰紅鈉瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基規(guī)格:9.0g/300ml 20袋/盒用途:培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)
弗拉特氏菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于弗拉特氏菌平板計(jì)數(shù)
豆粉瓊脂規(guī)格:250g用途:用于配制血瓊脂、巧克力瓊脂及亞碲鹽瓊脂
Iron瓊脂規(guī)格:250g用途:用于產(chǎn) H2S菌的分離培養(yǎng)
胰胨-亞硫鹽-環(huán)絲氨瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:250g用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))