綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養方法簡單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以內,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
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規格參數:
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
產腸毒素大腸埃希氏菌說明書 | Escherichi | EY-J963488 |
資源名稱: 產腸毒素大腸埃希氏菌
種屬: Escherichia coli ETEC O25:K19
分離基物: 美國進口雞爪
提供形式: 凍干物
安全等級: 2
模式菌株: no
應用領域: 質量控制。
培養基: 營養肉汁瓊脂培養基:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。121℃,15min。
生長條件: 37℃,好氧
存儲條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
Pseudomonas│tolaasii 中文名稱:托拉氏假單孢菌Pseudomonas│tolaasii提供形式:凍干物安全等級:4模式菌株:no培養方法培養基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Paenibacillus│amylolyticus 中文名稱:解淀類芽孢桿菌Paenibacillus│amylolyticus分離基物:腐殖質樣品提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:纖維素降解菌培養方法培養基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:98%
Snotrophomonas│sp. 中文名稱:寡養單胞菌Snotrophomonas│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:在無機鹽培養基:中添加100mg/L的甲萘威,降解率達30%。培養方法培養基:33生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:98%
Pantoea│sp. 中文名稱:泛菌Pantoea│sp.分離基物:市售產體表提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:在無機鹽培養基:中以5mg/l的孔雀石綠為碳源,與1/6LB共代謝培養,2天內孔雀石綠降解率大于70%培養方法培養基:33生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:98%
Aeromicrobium│sp. 中文名稱:氣微菌Aeromicrobium│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養物模式菌株:no應用領域:檢測、培養方法培養基:2生長條件:30-37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
Ralstonia solanacearum 中文名稱:茄科雷爾氏菌Ralstonia solanacearum分離基物:辣椒提供形式:凍干管,斜面培養物模式菌株:no應用領域:辣椒品種抗性平鑒定培養方法培養基:2傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養基:充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。生長條件:30℃生長特性大范圍為1.13~1.66×0.57~0.76μm,有1~4根鞭;在LB平板上,菌落為乳白色不規則形或近圓形;在TTC平板上,菌落為不規則形或近圓形,隆起,中間紅色四周白色。存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。 純度:97%
Streptococcus│equi subsp. Zooepidemicus 中文名稱:馬鏈球菌獸瘟亞種(馬鏈球菌動物傳染病亞種)Streptococcus│equi subsp. Zooepidemicus分離基物:土壤提供形式:斜面培養物模式菌株:no培養方法培養基:2生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
Bacillus│psychrosaccharolyticus 中文名稱:冷解糖芽孢桿菌Bacillus│psychrosaccharolyticus分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養物模式菌株:no培養方法培養基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
產腸毒素大腸埃希氏菌說明書FAM3B/PANDER 胰腺衍生因子抗體丁公藤2,4-二甲基-6-叔丁基Human PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) ELISA Kit
FAS/Apo-1/CD95 載脂蛋白A1抗體大黃(唐古特大黃)2,4-二甲基-6-叔丁基Human PDCN (Podocin) ELISA Kit
APOA1 載脂蛋白A1抗體牛蒡子4-甲氧基茴香硫Human Preptin ELISA Kit
FASN 脂肪合成酶抗體甘草(甘草)4-甲氧基茴香硫Human P-Cadherin (Cadherin, Placental) ELISA Kit
Apo B 載脂蛋白B抗體白芍2-正已基噻吩Human P-GP (Permeability Glycoprotein) ELISA Kit
FAST kinase Fas活化的絲/蘇氨激酶抗體血竭(麒麟竭)2-正已基噻吩Human SELP (P-Selectin) ELISA Kit
FasL 兔抗FasL抗體。紅花3,4-二硫酚Human RAPGEF1 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 1) ELISA Kit
fatty acid elongase 脂肪延長酶抗體連翹3,4-二硫酚Human Rac-GAP1 (Rac-GTPase Activating Protein 1) ELISA Kit