免費代測人分泌型免疫球蛋白(SIgA)ELISA試劑盒
輪狀病毒Elisa試劑盒標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關人分泌型免疫球蛋白(SIgA)ELISA試劑盒文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人分泌型免疫球蛋白(SIgA)ELISA試劑盒操作步驟
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
16μg/ ml
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
8μg/ ml
4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
4μg/ ml
3號標準品
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
2μg/ ml
2號標準品
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1μg/ ml
1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
加樣:輪狀病毒Elisa試劑盒分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 輪狀病毒Elisa試劑盒測定應在加終止液后15分鐘以內進行。